采用部分重疊引物設(shè)計，使PCR呈指數(shù)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳可見；擴(kuò)增產(chǎn)物為環(huán)狀，易于轉(zhuǎn)化。DMT酶消化體外降解非突變型質(zhì)粒模板(甲基化質(zhì)粒模板)和DMT感受態(tài)細(xì)胞體內(nèi)降解非突變型質(zhì)粒模板(甲基化質(zhì)粒模板)，從而有效地篩選突變克隆。
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